コロラド対ジョージア工科大学
患者由来の腫瘍様体は比較腫瘍学で広く使用されています。これらの翻訳関連モデルは、ソース組織の臨床的に意味のある特徴を保存しながら、診断発見、機構研究、治療スクリーニングに適したスケーラブルな患者固有の 3D システムを提供します。
画像クレジット: 横河流体イメージング テクノロジーズ株式会社
これらのモデルは、サンプルの入手可能性が限られている場合に特に価値があります。3D 培養を拡張すると、繰り返しのさらなる研究やさらなる特性評価に十分な材料が得られるためです。
腫瘍サブタイプ間および腫瘍サブタイプ内での本質的な不均一性には、集団レベルの代表的なデータを取得する分析手法が必要です。これは、低スループットの視覚検査がこのタスクに適切であることはほとんどないためです。
ただし、腫瘍の増殖は複雑であるため、このデータを取得することは困難です。腫瘍の培養 インビトロ 通常、組織のような空間パターン形成、組織化、および接触媒介シグナル伝達をサポートするには、足場ベースの培養マトリックスが必要です。細胞外マトリックス成分は腫瘍反応の直接視覚化に悪影響を与える可能性があります インビトロ。
一部のアッセイは足場マトリックスに埋め込まれた腫瘍様体を使用して実行できますが、顕微鏡での挙動を効果的に評価するには、一般にイメージングアーチファクトを軽減するためにマトリックスの除去が必要です。
ただし、腫瘍をサポートする 3D 微環境から抽出すると、細胞の損失、組織構造の破壊、および形態的変形のリスクが生じるため、マトリックスの除去には独自の課題が生じます。これにより、実行可能性、代表性、構造的完全性、再現性が損なわれます。
この論文では、複雑な 3D サンプルの特性を評価するための高スループットの非破壊法として、FlowCam を使用したフロー イメージング顕微鏡 (FIM) について検討します。
FlowCam を使用して、マトリゲル内で増殖した低継代犬腫瘍を分析しました®。このプロセスでは、1 回の実行で数百もの個別の 3D 構造の粒子数、形態、サイズ、構造の複雑さが定量化されました。
このプロセスは、スループットが低く、より手間のかかる手動顕微鏡法アプローチと非常に一致していることが判明しました。
患者由来の 4 つのサブタイプのデジタル画像解析により、明確なサイズ分布が示され、シート状構造と不均一なクラスターの半自動分類が可能になり、培養ワークフローの改良と腫瘍の不均一性の代表的な評価がサポートされました。
これらの発見は、代表的なデータセットを生成し、不均一性を維持する必要がある場合に、FlowCam を使用した FIM が初期の細胞培養応答を 3D で分析する有望な新しい手段であることを強調しています。
図1. マトリゲル上で増殖させた低継代犬腫瘍の定量分析のための代表的なワークフロー® FlowCam と比較明視野顕微鏡を使用します。画像クレジット: 横河流体イメージング テクノロジーズ株式会社
アプリケーション ノート全文を読んで、手動明視野顕微鏡との比較、患者由来の 4 つの腫瘍サブタイプの違い、形態学に基づく分類、品質管理、治療法検出、診断発見、およびより広範な細胞治療ワークフローにおける FlowCam の可能性など、方法論と結果をさらに詳しく調べてください。
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横河フルードイメージングテクノロジーズ株式会社について
横河流体イメージング テクノロジーズの使命は、ライフ サイエンスにおける目に見えない粒子の研究を明確にし、焦点を当てることです。当社は、FlowCam テクノロジーを利用して、地球の水域と飲料水の供給に有害な藻類がないか監視し、ワクチンや注射薬の安全性を高め、さまざまな用途で製品の品質を向上させる革新的なハードウェアとソフトウェアの開発に取り組んでいます。
FlowCam 機器は、デジタル イメージング、フロー サイトメトリー、顕微鏡検査の利点を 1 つのソリューション、つまりフロー イメージング顕微鏡法 (FIM) に組み合わせています。従来の粒子サイズと計数に加えて、FIM 画像ベースの分析により、バイオ医薬品、哺乳類細胞、マイクロプランクトン、エマルジョン、先端材料中の凝集体と目に見えない API 汚染物質の包括的な特性評価が可能になります。 FlowCam 機器は 50 か国以上で導入され、ライフサイエンス、材料研究、産業応用における研究、開発、環境モニタリングをサポートしています。
次のビデオでは、フロー イメージング顕微鏡法と、FlowCam がどのように機能して目に見えない粒子の計数、サイジング、特性評価、およびデジタル イメージングを提供するかについて学びます。
FlowCam 説明ビデオ: フロー イメージング顕微鏡とは何ですか?
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